基因剪輯技術(shù)強(qiáng)化酵母細(xì)胞生成脂肪酸的限制因素主要有以下幾個(gè)方面:首先,酵母細(xì)胞自身的生長速率和脂肪酸代謝通路的調(diào)控機(jī)制是一種動(dòng)態(tài)均衡過程,過多地削減某些基因的表達(dá)水平可能導(dǎo)致代謝失調(diào);其次,由于脂肪酸合成通路與其他代謝通路交叉,改動(dòng)單一基因的同時(shí)可能也影響到其他代謝通路中的關(guān)鍵基因;再次,酵母細(xì)胞內(nèi)存在復(fù)雜的代謝途徑和反饋調(diào)控機(jī)制,不同基因和通路之間相互作用加劇了基因剪輯的技術(shù)難度;最后,酵母細(xì)胞對環(huán)境的要求較高,包括溫度、pH值等多重因素,進(jìn)一步增加了操作的復(fù)雜度。